Leica TCS SP5 MP

Назначение

Система Leica TCS SP5 MP предназначена для проведения исследований с использованием лазерной конфокальной сканирующей микроскопии и мультифотонной микроскопии. Прибор позволяет визуализировать с высоким разрешением структуру и динамические процессы на поверхности и в глубине биологических образцов.

По данным производителя, Leica TCS SP5 MP — это специализированная конфокальная и мультифотонная система, разработанная для глубокой визуализации тканей, с широким выбором конфигураций ИК-лазеров, покрывающих практически все мультифотонные приложения.

Основа системы

Система построена на базе инвертированного моторизированного микроскопа Leica DMI6000CS с моторизированным XY-столиком и модулем автофокусировки по Z-оси. Перемещение препарата: по осям X/Y — 120/120 мм с точностью 3 мкм, по оси Z — 1,5 мм с шагом 3 нм.

Тандемная система сканирования

Ключевая особенность системы — тандемный сканер, объединяющий стандартный и резонансный сканеры в одном приборе:

Стандартный сканер (высокое разрешение)

• Максимальное разрешение: 8196 × 8196 пикселей
• Поле зрения: 22 мм
• Скорость сканирования линии: 1–2800 Гц
• Частота обновления кадра: 5 Гц (512×512), 50 Гц (512×16)
• Масштабирование: 1,0–64×
• Поворот поля сканирования: 200° в обоих направлениях

Резонансный сканер (высокая скорость)

• Максимальное разрешение: 1024 × 1024 пикселей
• Поле зрения: 15 мм
• Скорость сканирования линии: 8–16 кГц
• Частота обновления кадра: 28 Гц (512×512), 290 Гц (512×16)
• Масштабирование: 1,7–64×
• Поворот поля сканирования: 200° в обоих направлениях

Система светоделителя сканера позволяет использовать для возбуждения флуоресценции любое сочетание лазерных линий с селективностью 2 нм, одновременно отделяя до 8 линий лазеров.

Источники лазерного излучения

Мультифотонный импульсный инфракрасный лазер (диапазон перестройки 630–1080 нм) используется для двухфотонного возбуждения флуорофоров с длиной волны возбуждения менее 458 нм, а также для глубокой визуализации тканей на глубину до 400 мкм.

Объективы

• 10× — сухой
• 20× и 40× — водная иммерсия
• 63× и 100× — масляная иммерсия

Система детекции

Внутренняя конфокальная детекция

• 3 внутренних детектора (конфокальных канала), регистрация флуоресценции в диапазоне 400–800 нм с независимой регулировкой
• Ширина полосы чувствительности — шаг 1 нм, разрешение 5 нм
• АЦП: 12 или 18 бит

Неконфокальная детекция

• Детектор проходящего света (TLD)
• 2 внешних неконфокальных детектора отражённого света (NDD-RLD) с наборами светофильтров:
• FITC-TRITC (SP 680, BS 560, BP 525/50, BP 585/40)
• DAPI-TRITC (SP 680, BS 495, BP 460/50, BP 525/50)

Цифровая камера

Leica DFC300 FX — цветная CCD-камера (1,4 Мпикс.) с RGB-фильтром Байера, скорость съёмки до 60 кадров/с, глубина цвета 36 бит, время выдержки от 5 мкс до 10 мин.

Режимы сканирования

xt, xy, xyt, xyλ, xz, xzλ, xyz, xyzλ, xzt, xyzt, xytz

Методы наблюдения в проходящем свете

• Светлое поле
• Поляризация
• Дифференциально-интерференционный контраст (ДИК)

Дополнительное оборудование

• Камера для поддержания условий, близких к физиологическим, для длительных экспериментов с живыми клетками и срезами тканей
• Система общей и локальной перфузии для подачи и смены растворов

Программное обеспечение

LAS AF — позволяет создавать серии изображений с последующей 3D-реконструкцией изучаемых объектов и их анимацией.